Uso de sondas fluorescentes en el análisis cinético de la interacción virus-célula / Beatriz Elena Mercado Perrín.
Tipo de material:
TextoIdioma: Español Series Kuznar Hammarstrand, Juan ; | Farías Odde, Gilda ; Editor: Valparaíso, Chile : Universidad de Valparaíso, 1990Descripción: 59 hojas : ilustracionesTipo de contenido: - text
- unmediated
- volume
- M
| Tipo de ítem | Biblioteca actual | Colección | Signatura topográfica | Copia número | Estado | Fecha de vencimiento | Código de barras | Reserva de ítems | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Tesis Pregrado
|
Ciencias Tesis | Tesis | M M553u 1990 | c.1 | Disponible | 00097552 |
Químico Farmacéutico.
Incluye bibliografía.
En este estudio de la interacción virus-célula se ha utilizado el virus de la Necrosis Pancreática Infecciosa (IPNV) como modelo experimental debido a su simpleza estructural y funcional. El estudio de la interacción virus-célula requiere de un método capaz de sensar el virus en forma eficiente, aún a bajas concentraciones. Dada la gran sensibilidad de las técnicas en las que se utilizan marcadores fluorescentes, se propone ensayar la Espectroscopía de Fluorescencia como método para seguir la cinética de unión virus-receptor. Primeramente se optimizó la técnica de conjugación del virus IPN con isotiocianato de fluoresceina (FITC), una sonda que puede unirse convalentemente a las proteínas externas del virus. Se logró una mayor intensidad de emisión por particula viral, cautelando la funcionalidad del virus. Posteriormente se diseñó y aplicó un método para seguir la cinética de asociación del virus fluorescente a la célula. En términos generales, este consistió en infectar una monocapa celular confluente con una suspensión de virus conjugado; se siguió el decaimiento de la intensidad de fluorescencia de la suspensión en el tiempo como una forma indirecta de medir la asociación del virus a la célula. Los intentos de medir directamente la cantidad de virus fluorescentes asociada a las células resultaron infructuosos debido a la dispersión de la luz provocada por restos celulares en suspensión. Este fenómeno constituyó una interferencia importante dada la alta sensibilidad utilizada. Se realizó además un experimento en el que se midió la...