Efecto del incremento de calcio intracelular y de la activación de la proteínakinasa C sobre los niveles celulares de la proteina snap-25 / Carmen Sepúlveda B.

Químico Farmacéutico.

La SNAP-25 es una proteína neuroespecífica ubicada en la membrana presináptica, donde juega un rol importante en la fisiología del terminal nervioso. En la presente tesis se estudió el efecto del incremento de Ca2+ intracelular y la activación de la proteinkinasa C (PKC) sobre la expresión de la SNAP-25 en cultivos celulares de explantes de hipocampo, de cerebelo y células PC12, línea celular proveniente de feocromocitoma de rata. Los efectos sobre la expresión de la SNAP-25 se evaluaron utilizando la técnica de Western blot. El incremento de Ca2+ intracelular se indujo mediante una solución despolarizante de KCl 50mM, mientras que la PKC fue activada con el éster de forbol 13-acetato-12-miristato (PMA) 10uM o el ácido araquidónico (AA) 100ng/mL. Los resultados en general evidenciaron que 24 horas de incubación con altas concentraciones de KCl, indujeron un aumento de los niveles de SNAP-25 en cultivo de explantes de hipocampo y en células PC12, pero no en cultivo de explantes de cerebelo. Por otro lado, 24 horas de estimulación con AA sólo indujeron un aumento en los niveles de la SNAP-25 en cultivos de explantes de hipocampo. 12 horas de estimulación con PMA produjeron un incremento marginalmente significativo, en los niveles de la SNAP-25 en cultivos de explantes de hipocampo, en células PC12 fueron necesarias 72 horas de incubación para producir un efecto. En cultivo de explantes de cerebelo no se observó respuesta a PMA. Estos resultados indican que tanto el incremento de Ca2+ intracelular como la activación de la PKC modulan la expresión de la...