Meneses Zúñiga, Cristian Víctor Manuel,

Cultivo y diferenciación miogenica de celulas satelites de musculo extensor digitorum longus de conejo / Cristian Victor Manuel Meneses Zuñiga. - 64 hojas.



Las células satélites son las células progenitoras del músculo esquelético en el adulto y se consideran como el principal tipo de célula implicada en la regeneración del músculo esquelético. En los últimos años el avance de la ciencia ha permitido comprender la biología y las aplicaciones de estas células. De acuerdo con estos avances, la presente investigación se enfocó en establecer un protocolo y evaluar la expresión de transcritos como marcadores de diferenciación en células satélites expuestas a distintos medios miogénicos a partir de biopsias de músculo esquelético. Estas biopsias permitieron recuperar fibras musculares esquelética del músculo extensor digitorum longus de conejo, tratado con colagenasa tipo I y separación mecánica. Luego, se aislaron y cultivaron células satélites obtenidas a partir de estas fibras aisladas para someterlas a dos condiciones pro-miogénicas distintas: una más conservadora (EDL-A) y otra dirigida para promover su diferenciación (EDL-B). Las células satélite se caracterizaron mediante la expresión de un marcador transcripcional específico de estas, como Pax7, y el proceso de diferenciación se caracterizó mediante la evaluación de la expresión de marcadores transcripcionales asociados a sus diferentes etapas de diferenciación miogénica, temprana (desmina), intermedia (miogenina) y tardía (cadena pesada de miosina). Se obtuvieron amplificaciones para pax-7 y desmina, las cuales establecen que se logró obtener cantidades suficientes de células satélite para lograr que estas se cultivaran y posteriormente diferenciaran en etapas tempranas de diferenciación. En tanto, las amplificaciones de los marcadores para etapas intermedias (miogenina) y tardías de diferenciación (cadena pesada de miosina) resultaron en amplificaciones indetectables. Estos resultados, aunque requieren más estudios, sugieren que es posible aislar células satélite a partir del músculo extensor digitorum longus de conejo.


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