Morfogénesis del virus de la necrosis pancreática infecciosa : determinación preliminar de las condiciones experimentales para su estudio /
Miguel Reyes H.
- 54 hojas : ilustraciones.
- Kuznar Hammarstrand, Juan, Profesor guía. .
Químico Farmacéutico.
El virus de la necrosis pancreática infecciosa, IPNV, es un patógeno de gran inportancia ecológica y económica. Pertenece a la familia Birnaviridae la cual se caracteriza por poseer un genoma bicatenario y bisegmentado. Se conocen aspectos generales de su biología molecular y mecanismo de penetración, sin embargo, su morfogénesis es prácticamente desconocida. La finalidad de este trabajo fue determinar, en forma preliminar, las condiciones experimentales para el estudio de la morfogénesis de IPNV en células de cultivo CHSE-214. Para lo cual, se realizó una descripción morfológica del proceso infectivo y una identificación inmunobioquímica de proteínas virales a distintos tiempos post-infección. Las observaciones realizadas a nivel ultraestructural mostraron la aparición de viriones progenie pasadas 12 horas post-infección. Para identificar las macromoléculas involucradas en la formación de intermediarios en la morfogenesis del virus, se definieron las condiciones para marcar metabólicamente las proteínas virales con 35 S-metionina y se desarrolló una metodología para inmunoprecipitar a éstos desde células infectadas. En el aislamiento selectivo de complejos intermediarios se empleó un anticuerpo monoclonal contra la proteína Vp3/4. De esta forma, se aislaron asociaciones proteicas virales las cuales eran evidentes pasadas 7 horas post-infección. De los resultados obtenidos se conluyó que la metodología diseñada es apropiada para identificar asociaciones entre proteínas y/o entre ácido nucleico y proteínas las cuales involucran a Vp3/4.