Validación de un método por cromatografía líquida de alta resolución para la cuantificación de leucotrienos en orina / María Julia Fuentes González.

Químico Farmacéutico.

Los cisteinil leucotrienos, LTC4, LTD4 y LTE4, son mediadores de inflamación, los cuales son producidos en los mastocitos, su síntesis es responsable de los fenómenos de reducción del diámetro y aumento de la secreción mucosa bronquial durante las crisis obstructivas y es importante poder cuantificar su concentración en fluidos biológicos para poder justificar el tratamiento de pacientes con antagonistas de leucotrienos, tales como Zafirlukast y Montelukast. El LTE4 provoca una broncoconstricción inferior a la producida por LTC4 y LTD4, pero de mayor duración y una proporción de éste se elimina sin ningún cambio por la orina y, por lo tanto, la cuantificación urinaria de LTE4 es un método sensible y no invasivo y puede utilizarse para monitorizar la producción de leucotrienos en el hombre. Para la cuantificación de LTE4 en orina está disponible un ensayo elaborado y distribuido por Cayman Chemical Company (Ann Arbor, MI), el cual es un ELISA del tipo competitivo y requiere para la purificación de la muestra de un sorbente de afinidad, que a la fecha presenta problemas de estabilidad, no existiendo disponibilidad comercial del mismo. Debido a lo anterior, ha sido necesario buscar métodos alternativos destinados a la purificación de las muestras de orina y a la consiguiente cuantificación de LTE4 por HPLC. El uso de un método alternativo para la cuantificación de LTE4 en orina, requerirá de la implementación, optimización y validación del mismo, con el objeto de documentar que el método cumple con los requisitos para la aplicación analítica.