000			04093nam a2200349 i 4500
001			100053611
003			UVAL
005			20240528170542.0
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008			050613s2001 cl ad m 00010 spa d
040			_aDIBRA _bspa _cUVAL _erda
041	0		_aspa
084			_aM
100	1		_aGuzmán Cayupi, David Aarón _994509, _eauthor.
245	1	0	_aMétodos de extracción y separación de proteínas y pigmentos con fines de caracterización bioquímica de algas / _cDavid Aarón Guzmán Cayupi.
264		1	_aValparaíso, Chile : _bUniversidad de Valparaíso, _c2001.
300			_axvi, 98 hojas : _bilustraciones.
347			_2rda _atext file _bPDF
502			_bTitulo profesional Biólogo Marino. Licenciado en Biología Marina. _cUniversidad de Valparaíso. _d2001.
504			_aBibliografía: hojas 82-98.
520			_aEn algas, los pigmentos, sustancias de reserva y características de los flagelos son los caracteres tradicionales que se utilizan en la determinación de divisiones, los dos primeros son propiedades fuertemente influenciadas por el medio ambiente. Ante esto, la taxonomía bioquímica mediante la caracterización de proteínas surge como un complemento y apoyo interesante a los métodos de determinación y clasificación existentes. La hipótesis de este trabajo se fundamenta en que los patrones proteicos de algas pertenecientes a diferentes divisiones (enzimas de defensa, ·fosfatasas y glicoproteínas de membrana), pueden presentar una variabilidad similar a la expresada a través de las clorofilas. Para ello fue necesario diseñar metodologías capaces de obtener enzimas activas y proteínas solubles a partir de biomasa liofilizada. Además, el diseño de una metodología para la extracción de pigmentos desde células liofilizadas y la determinación de clorofilas por espectroscopía de emisión. En la presente investigación se utilizaron las siguientes especies: Lyngbya conferooides (Cyanophyta = Cyanobacteria), Phaeodactylum tricomutum (Chromophyta), Aureococcus sp (Chromophyta) y Tetraselmis suecica (Chlorophyta), las cuales fueron cultivadas en condiciones controladas, liofilizadas y guardadas a -20°C. Los métodos de análisis de proteínas empleados, consisten en técnicas de fraccionamiento de enzimas activas (filtración en gel Sephadex G-200), detección de actividad enzimática (fosfatasa ácida, fosfatasa alcalina y catalasa) y glicoproteínas en geles de electroforesis, además de la separación bidimensional de proteínas por la misma técnica (2D-PAGE). La composición pigmentaria fue analizada por cromatografía en capa fina y espectroscopía de absorción y emisión. Ambos perfiles, proteicos y de clorofilas fueron analizados por taxonomía numérica y programas de bioinformática (PHYLIP y WET), cuyos resultados fueron comparados estadísticamente. El método de solubilización de proteínas para electroforesis bidimensional propuesto presentó buenos resultados, al igual que los protocolos diseñados para el trabajo con enzimas, glicoproteínas y el análisis de clorofilas por fluorescencia. Los resultados obtenidos desde los perfiles proteicos revelan diferencias en el agrupamiento e inferencia de filogenia, entre especies pertenecientes a diferentes divisiones, en comparación a lo obtenido a partir de la composición de clorofilas. Sin embargo, la Fosfatasa Acida, la Superóxido Dismutasa y las glicoproteínas de membrana generan valores de distancia taxonómica entre especies, comparables a lo obtenido a partir de las clorofilas.
650	1	4	_aALGAS _xBIOQUIMICA _993779.
650	1	4	_aCULTIVO DE MICROALGAS _xCULTIVO _933026.
700	1		_aTapia Domínguez, Guillermina, _eProfesora guía _948467.
700	1		_aCollantes Sáa, Gloria _eProfesora informante _970875
710	2		_aUniversidad de Valparaíso (Chile). _bFacultad de Ciencias del Mar y de Recursos Naturales. _bCarrera de Biología Marina _998840.
942			_c1 _2ddc
999			_c65533 _d65533