Sitios de unión de micro RNAs a Rnf19, análisis in silico e in vitro con células germinales de ratón /
Gallardo Aguilera, Luis
Sitios de unión de micro RNAs a Rnf19, análisis in silico e in vitro con células germinales de ratón / Luis Gallardo Aguilera. - 67 hojas : : il., tablas.
Bibliografía: h. 48-50.
La espermatogénesis es un proceso de diferenciación celular que está regulado, entre otros factores, por mecanismos de expresión génica diferencial. Uno de los mecanismos de regulación descritos es la regulación por microRNAs. Se ha descrito en la literatura que genes con transcritos que tienen regiones 3' no traducidas (UTR) inusualmente largas, podrían ser dianas de la regulación por microRNAs. Estos actuarían degradando o silenciando la expresión génica a través de su unión a la región 3' UTR de los mRNAs. Este podría ser el caso del gen Rnf19 que tiene expresión diferencial en testículo. Rnf19 posee dos transcritos uno de 2.8 Kb específico de testículo y otro de 4,2 kb, de expresión ubicua en todos los tejidos. Este transcrito presenta una región 3' UTR larga sugiriendo que pudiera estar regulado por microRNAs al menos en testículo. En base a esto, realizamos un análisis in silico que arrojó que el transcrito de 4.2 kb de Rnf19 posee varios sitios potenciales de unión para microRNAs, entre los que destacan tres de expresión principal en testículo. Seguidamente, se generaron dos construcciones plasmídicas fusionando las regiones 3´ UTR de cada uno de los dos transcritos de RNf19 a una proteína marcadora diferente. Estas construcciones se transfectaron en líneas celulares derivadas de células testiculares., como Sertoli (TM4), espermatogenias (GC-I) y espermatocitos (CG-II). Los resultados muestran que hay una disminución de la fluorescencia en las células GC-I, no viéndose cambios en las otras dos líneas. Eso sugiere que la región 3´ UTR larga de Rnf19 estaría regulando la traducción de las proteína marcadoras al menos en células GC-I.
ARN
ESPERMATOGENESIS
REGULACION GENETICA
Sitios de unión de micro RNAs a Rnf19, análisis in silico e in vitro con células germinales de ratón / Luis Gallardo Aguilera. - 67 hojas : : il., tablas.
Bibliografía: h. 48-50.
La espermatogénesis es un proceso de diferenciación celular que está regulado, entre otros factores, por mecanismos de expresión génica diferencial. Uno de los mecanismos de regulación descritos es la regulación por microRNAs. Se ha descrito en la literatura que genes con transcritos que tienen regiones 3' no traducidas (UTR) inusualmente largas, podrían ser dianas de la regulación por microRNAs. Estos actuarían degradando o silenciando la expresión génica a través de su unión a la región 3' UTR de los mRNAs. Este podría ser el caso del gen Rnf19 que tiene expresión diferencial en testículo. Rnf19 posee dos transcritos uno de 2.8 Kb específico de testículo y otro de 4,2 kb, de expresión ubicua en todos los tejidos. Este transcrito presenta una región 3' UTR larga sugiriendo que pudiera estar regulado por microRNAs al menos en testículo. En base a esto, realizamos un análisis in silico que arrojó que el transcrito de 4.2 kb de Rnf19 posee varios sitios potenciales de unión para microRNAs, entre los que destacan tres de expresión principal en testículo. Seguidamente, se generaron dos construcciones plasmídicas fusionando las regiones 3´ UTR de cada uno de los dos transcritos de RNf19 a una proteína marcadora diferente. Estas construcciones se transfectaron en líneas celulares derivadas de células testiculares., como Sertoli (TM4), espermatogenias (GC-I) y espermatocitos (CG-II). Los resultados muestran que hay una disminución de la fluorescencia en las células GC-I, no viéndose cambios en las otras dos líneas. Eso sugiere que la región 3´ UTR larga de Rnf19 estaría regulando la traducción de las proteína marcadoras al menos en células GC-I.
ARN
ESPERMATOGENESIS
REGULACION GENETICA