Estudio de las condiciones de hidrólisis polisacáridos pécticos y su aplicación en la determinación de azúcares neutros por cromatografía líquida / María José Olivares Díaz.

Químico Farmacéutico.

La presente investigación se enfocó en estudiar distintas condiciones hidrolíticas ácidas y enzimáticas sobre pectina cítrica comercial con el objetivo de establecer un método de hidrólisis rápido, preciso y cuantitativo para polisacáridos pécticos y su aplicación en la determinación de azúcares neutros por cromatografía líquida. Para este efecto se evaluaron las condiciones de hidrólisis ácida con los ácidos sulfúrico 0,05 y 1 M, trifluoroacético 1 M, y clorhídrico 2 M, a una temperatura de 100 y 120 °C durante 60 minutos, y enzimática con los preparados multienzimáticos comerciales Viscozyme L, Rohapect DA-6L y Pectinex Ultra SPL, con concentraciones de enzima/sustrato de 2, 4, y 10 % a una temperatura de 45 y 60 °C, durante 3, 24 y 48 horas de incubación. Las muestras anteriores fueron procesadas a través de tres métodos, primero, por el método de determinación de azúcares reductores de Miller, segundo, a través del método de cromatografía líquida de alta resolución con detector de índice de refracción, y, por último, por cromatografía líquida de alta resolución con detector de arreglo de diodos previa derivatización con 1-fenil-3-metil-5-pirazolona. Los resultados obtenidos permitieron concluir que las condiciones de hidrólisis ácidas evaluadas lograron reducción del grado de polimerización de la pectina, pero no fueron suficientes para hidrolizar a monosacáridos. Por otro lado, el mayor grado de hidrólisis a monosacáridos se obtuvo con la condición enzimática Viscozyme 4 % enzima/sustrato a 45 °C.