Caracterización bioquímica de la proteína fosfatasa 2A de Mytilus chilensis (Bivalvia, Mollusca) / Mariella Rivas Álvarez.

Por:

Rivas Alvarez, Mariella

Colaborador(es):

Tipo de material: Texto

TextoIdioma: Español Fabricante: Valparaíso, Chile : Universidad de Valparaíso, 1999Descripción: xvi, 87 hojas : ilustraciones, gráficos, tablasTipo de contenido:

text

Tipo de medio:

unmediated

Tipo de soporte:

volume

Tema(s):

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Nota de disertación: Título profesional Biólogo Marino. Licenciado en Biología Marina. Universidad de Valparaíso. 1999. Resumen: En esta Tesis se purifica y se caracteriza la proteína fosfatasa 2A (PP2A) de Mytilus chilensis. Esta enzima es inhibida específicamente por las toxinas que componen el Veneno Diarreico de Moluscos (VDM) y también por las hepatotoxinas, denominadas rnicrocistinas, las cuales son producidas por cianobacterias. Se determinaron las condiciones óptimas para su actividad: pH, fuerza iónica y dependencia de cationes divalentes y se estudió su estabilidad. Además, se determinaron las constantes cinéticas de su reacción: constante de Michaelis-Menten (Km) y velocidad máxima (Vmáx). Esta enzima se encuentra formada por tres subunidades: una de 62 Kda que correspondería a la subunidad reguladora, otra de 58 Kda que sería la subunidad B y por último, una de 28 Kda que debería ser la subunidad catalítica. Esto fue demostrado utilizando Cromatografía Líquida de Alta Resolución de separación por tamaño (HPLC size exclusion) y mediante Electroforesis en Geles de Poliacrilamida con detergente aniónico, dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE). De las cinéticas de inhibición, se determinaron los Ic50para los inhibidores específicos de PP2A de M chilensis siendo estos 0,25 ng·ml¯¹ , 2 ng·ml¯¹ y 0,8 ng·ml¯¹ para Microcistina-LR, Ác. O.kadaico y -Dinophysis Toxina-.1, respectivamente. Se realizaron las curvas de calibración para cada una de estas toxinas, demostrándose que el ensayo de inhibición de la actividad de esta enzima sirve para la detección y cuantificación de estas toxinas. Adicionalmente, se dan evidencias de que el ensayo enzimático detecta las toxinas del VDM lo cual se confirma por HPLC.

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Tipo de ítem	Biblioteca actual	Colección	Signatura topográfica	Estado	Fecha de vencimiento	Código de barras	Reserva de ítems
Tesis Pregrado	Ciencias del Mar Tesis	Tesis	M R618c 1999	Disponible		00034327

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Título profesional Biólogo Marino. Licenciado en Biología Marina. Universidad de Valparaíso. 1999.

Bibliografía : hojas 79-87.

En esta Tesis se purifica y se caracteriza la proteína fosfatasa 2A (PP2A) de Mytilus chilensis. Esta enzima es inhibida específicamente por las toxinas que componen el Veneno Diarreico de Moluscos (VDM) y también por las hepatotoxinas, denominadas rnicrocistinas, las cuales son producidas por cianobacterias. Se determinaron las condiciones óptimas para su actividad: pH, fuerza iónica y dependencia de cationes divalentes y se estudió su estabilidad. Además, se determinaron las constantes cinéticas de su reacción: constante de Michaelis-Menten (Km) y velocidad máxima (Vmáx). Esta enzima se encuentra formada por tres subunidades: una de 62 Kda que correspondería a la subunidad reguladora, otra de 58 Kda que sería la subunidad B y por último, una de 28 Kda que debería ser la subunidad catalítica. Esto fue demostrado utilizando Cromatografía Líquida de Alta Resolución de separación por tamaño (HPLC size exclusion) y mediante Electroforesis en Geles de Poliacrilamida con detergente aniónico, dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE). De las cinéticas de inhibición, se determinaron los Ic50para los inhibidores específicos de PP2A de M chilensis siendo estos 0,25 ng·ml¯¹ , 2 ng·ml¯¹ y 0,8 ng·ml¯¹ para Microcistina-LR, Ác. O.kadaico y -Dinophysis Toxina-.1, respectivamente. Se realizaron las curvas de calibración para cada una de estas toxinas, demostrándose que el ensayo de inhibición de la actividad de esta enzima sirve para la detección y cuantificación de estas toxinas. Adicionalmente, se dan evidencias de que el ensayo enzimático detecta las toxinas del VDM lo cual se confirma por HPLC.